DETERMINAÇÃO ELETROANALÍTICA EM PLANTAS MEDICINAIS E FITOTERÁPICOS: UMA REVISÃO

ª LÚCIA CODOGNOTO DE OLIVEIRA DIADEMA 2023 REBECCA COELHO JORDÃO DAS NEVES DETERMINAÇÃO ELETROANALÍTICA EM PLANTAS MEDICINAIS E FITOTERÁPICOS: UMA REVISÃO TERMO DE APROVAÇÃO Trabalho de conclusão da unidade curricular Projetos Dirigidos em Química, como requisito parcial para a obtenção do grau de Bacharel em Química. O examinado foi aprovado com anota. Diadema, 2023. Dedico esta monografia aos meus pais, aos meu irmãos, por terem me dado o apoio necessário à realização deste sonho. AGRADECIMENTOS Agradeço a Deus, que fez com que eu alcançasse meus objetivos durante meus anos de estudos. Controle de qualidade. Técnicas eletroanalíticas ABSTRACT Medicinal plants bring together many substances that can act together, which is one of the reasons that make the standardization and quality control of these herbal medicines very complex.

The electroanalytical techniques appear as an alternative for the engineering of organic compounds of interest, because in addition to being simple and inexpensive, they offer the possibility of determining the concentration of the compound under study directly in the sample and without pre-treatments. However, with regard to the electroanalytical study of medicinal plants and herbal medicines, few works are found in the literature. In this way, the objective of this work is to make a literature review and a critical evaluation (qualitative and quantitative) on the analytical logic of the active principle of medicinal plants and herbal medicines such as passion fruit, guaco and valerian. LISTA DE GRÁFICOS Gráfico 1 Autoral - Artigos publicados sobre plantas medicinais em diferentes técnicas. Gráfico 2: As 3 plantas medicinais para esse estudo. Gráfico 3: Artigos publicados sobre a determinação de Quercetina por meio da voltametria e eletroanalitica.

Gráfico 4: Artigos publicados envolvendo a determinação da quercetina na Passiflora por diferentes técnicas. Gráfico 5: Artigos publicados sobre a determinação de rutina por meio da voltametria e eletroanalitica. Quercetina 30 3. Rutina 32 3. Valeriana 35 3. Mikania glomerata Spreng (Guaco) 39 3. Cumarina 39 3. Muitos dos métodos relatados na literatura para a análise de plantas medicinais consomem tempo e envolvem procedimentos elaborados (GALLI, 2006). As técnicas eletroanalíticas surgem como uma alternativa para a determinação de princípios ativos em plantas medicinais e fitoterápicos, pois além de simples e de baixo custo, elas oferecem a possibilidade de se determinar a concentração do composto de interesse diretamente na amostra, sem pré-tratamentos ou com um tratamento mais simples da amostra. Adicionalmente, esses métodos podem levar eventualmente ao desenvolvimento de sensores específicos, possibilitando assim o monitoramento in loco de ambientes aquáticos de interesse.

Diversos compostos orgânicos, vêm sendo estudados e os resultados obtidos para vários sistemas são muito satisfatórios (VAZ, 1997). Desta forma, a análise eletroanalítica de plantas medicinais e fitoterápicos, em função da possibilidade do tratamento mínimo das amostras, levando a uma considerável economia de tempo e de custos é de grande interesse. A eficácia dos componentes ativos nas plantas medicinais pode variar dependendo da forma de extração. Por isso, para o desenvolvimento de fitoterápicos, as condições precisam ser estudadas, analisando em conjunto as fontes vegetais e seus fitoquímicos isolados que possuem múltiplos efeitos farmacológicos em distúrbios relacionados. As plantas selecionadas para revisão neste trabalho, maracujá e valeriana, são amplamente utilizadas para tratamento da ansiedade na cultura popular brasileira e o guaco que possui propriedades anti-inflamatórias e é muito utilizado no tratamento das vias respiratórias.

Os medicamentos ansiolíticos tratam os transtornos de ansiedade e depressão que são condições psiquiátricas que trazem prejuízos funcionais piorando consequentemente a qualidade de vida do indivíduo. O desequilíbrio de neurotransmissores e indicadores para respostas inflamatórias (citocinas) como o estresse oxidativo (espécies reativas de oxigênio e peroxidação lipídica) podem ser indicativos para os sintomas de depressão e ansiedade (YONG-HYUN, 2022). A valeriana é proveniente da espécie Valeriana officinalis L. e em sua composição contém pelo menos 0,015% (p/p) de ácidos sesquiterpênicos totais, expressos em ácido valerênico (C15H22O2), segundo a Farmacopeia Brasileira (HAO FAN, 2020). A hesperidina, pertencente a classe das flavonas, é o princípio ativo presente na valeriana responsável por muitas atividades farmacológicas, por exemplo, efeitos antioxidantes, anti inflamatórios e neuroprotetores (DAVID; KENNEDY, 2006).

A linarina é outro princípio ativo encontrado na valeriana e é um flavonoide da classe das citroflavonas (CZELUSNIAK et. al. Contudo, quando se trata do controle de qualidade de fitoterápicos, há ainda várias preocupações. Pesquisas apontam a presença de irregularidades que podem comprometer a eficácia do produto e representar riscos para a saúde humana (ENGEL, I. C. FERREIRA, 2008). Uma das causas pode ser atribuída às indústrias responsáveis pela fabricação desses produtos, que são frequentemente de pequeno porte e operam em condições precárias. C. FERREIRA, 2008). Nesse contexto, os métodos eletroquímicos desempenham um papel importante na caracterização das propriedades de oxirredução de moléculas. Esses métodos permitem obter informações sobre os potenciais redox e a transferência de elétrons nas reações (BORGES FILHO, 2014).

Com o objetivo de obter análises mais rápidas e econômicas, os métodos eletroanalíticos têm ganhado destaque. Sendo amplamente utilizada em análises químicas e bioquímicas para a detecção e quantificação de espécies químicas (Firme, 2020). A polarografia foi um marco na eletroquímica analítica, permitindo a determinação quantitativa de substâncias e a investigação de mecanismos de reação. Heyrovský recebeu o Prêmio Nobel de Química em 1959 por suas contribuições na área da voltametria (Mortimer, 2017). Existem diferentes tipos de voltametria, como a voltametria cíclica, voltametria de onda quadrada, voltametria de pulso diferencial, entre outras. Cada uma dessas técnicas possui características específicas, mas todas envolvem a variação controlada do potencial elétrico para gerar uma corrente elétrica mensurável (Brett & Oliveira, 2013).

Em resumo, a voltametria é uma técnica eletroquímica utilizada para análises químicas e bioquímicas, permitindo a detecção e quantificação de espécies químicas. A técnica teve origem na polarografia desenvolvida por Jaroslav Heyrovský, que recebeu o Prêmio Nobel de Química em 1959 por suas contribuições nessa área. Existem diferentes tipos de voltametria, como a voltametria cíclica, voltametria de onda quadrada, voltametria de pulso diferencial, entre outras. Cada técnica possui características específicas, mas todas envolvem a variação controlada do potencial elétrico para gerar uma corrente elétrica mensurável. Na voltametria cíclica, o potencial elétrico é variado em uma faixa específica, e a corrente elétrica resultante é medida. Data da pesquisa: 26/03/2023 Fonte: A autora (2023).

Conforme apresentado na figura 1, podemos concluir que cerca 95,97% dos artigos publicados sobre plantas medicinais envolvem a técnica de cromatografia líquida de alta resolução, cerca de 2,90% envolve a técnica de voltametria e 1,14% envolve o termo eletroanalítica. Isso ocorre devidos as técnicas eletroanaliticas serem novas e a técnica de HPLC ser padronizada pela ANVISA para realizar a determinação de plantas medicinais. A diferença no número de estudos entre a determinação de plantas medicinais por eletroanalítica e cromatografia pode ser atribuída a várias razões, entre elas, pela a cromatografia ser uma técnica mais estabelecida. A cromatografia é uma técnica analítica amplamente utilizada e bem estabelecida na área de ciências farmacêuticas e pesquisa de plantas medicinais.

Já o Scopus tem uma ampla base de dados englobando mais de 75 milhões de registros bibliográficos, em termos de qualidade o mesmo possui rigorosa seleção das fontes de informações, essa base possui especialistas em indexação que analisam e classificam cada documento individualmente para garantir sua precisão e relevância porem o Scopus pode possuir algumas lacunas na cobertura de publicações em algumas áreas acadêmicas. Já o Web of Science é muito conhecido por sua cobertura histórica desde 1900, a qualidade do conteúdo do Web of Science é considerada alta por sua rigorosa seleção incluindo a equipe de especialistas em indexação na verificação e analise dos artigos. Porém, o Web of Science pode não ser muito abrangente em algumas áreas de conhecimento e em estudos regionais.

Gráfico 2: As 3 plantas medicinais para esse estudo Fonte: A autora (2023). Na figura 2, ao afinar os resultados de pesquisa, podemos observar que encontramos um maior número de artigos sobre a Passiflora (BORGES FILHO, 2014). C. FERREIRA, 2008). Por outro lado, a Valeriana e o Guaco podem ter menos pesquisas disponíveis em comparação com a Passiflora por uma série de razões, como menor popularidade, uso menos difundido em produtos comerciais, menos interesse científico ou menos potencial farmacológico conhecido. No entanto, é importante notar que a disponibilidade de pesquisa pode mudar ao longo do tempo, à medida que mais estudos são realizados e novas informações são descobertas sobre essas plantas medicinais (BORGES FILHO, 2014; ENGEL, I. C. O maracujá é uma fonte rica de flavonoides, especialmente flavonoides do tipo C-glicosídeo, como a vitexina e a isovitexina.

Esses compostos são conhecidos por suas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias, além de serem úteis na redução da ansiedade e na promoção do sono. A determinação eletroanalítica em plantas medicinais e fitoterápicos tem se mostrado uma importante abordagem na análise e caracterização desses materiais, contribuindo para a identificação e quantificação de compostos bioativos presentes. Dentre as plantas medicinais estudadas, destaca-se a Paciflora, uma espécie conhecida por suas propriedades terapêuticas. Neste contexto, este tópico abordará a aplicação da determinação eletroanalítica na análise da Paciflora, com foco na identificação e quantificação de seus compostos bioativos. A CE-MEKC permite a determinação simultânea de diferentes compostos bioativos, proporcionando uma análise mais abrangente da composição química da Paciflora (HEMS, 2016).

Em conclusão, a determinação eletroanalítica tem se mostrado uma ferramenta poderosa na análise de plantas medicinais e fitoterápicos, como a Paciflora. Através do uso de técnicas eletroquímicas, é possível identificar e quantificar compostos bioativos presentes na Paciflora, como alcaloides, flavonoides e taninos. A técnica de voltametria cíclica tem sido amplamente utilizada para a detecção de compostos redutores e oxidantes, permitindo estimar suas concentrações. Além disso, a eletroforese capilar eletrocinética micelar (CE-MEKC) tem se mostrado uma abordagem promissora na separação e quantificação de compostos polares presentes na planta. Foi utilizada a técnica de voltametria cíclica em Tampão BR 0,1 mol L -1 , com 50% de etanol, em pH 3,0 e velocidade de varredura em 0,05 V s-1.

Os autores relatam que a apigenina apresentou dois picos de oxidação sendo o pico 1 em 1,03 V e o pico 2 em 1,23 V, em um sistema irreversível. Verificaram que a corrente de pico diminui após múltiplos ciclos o que pode ser explicado devido à baixa solubilidade no estado oxidado e o acúmulo do flavonoide na superfície do eletrodo durante o processo (XING et al. Figura 2 – Estrutura química de apigenina. Fonte: ChemDraw (2021). desenvolveram uma metodologia eletroanalítica para a determinação da quercetina, um flavonoide natural que possui como principais propriedades as ações antiinflamatória, antiviral e cardiovasculares, em amostras de suco de maçã e concluíram que a aplicação prática do método é vantajosa. Kuzmanović et al. estudaram o comportamento eletroquímico da baicaleína, principal flavonoide ativo da Scutellaria baicalensis, usando o eletrodo de BDD, e sua determinação em amostras de urina humana (PLESKOV, 2000).

Como o eletrodo de BDD está sendo cada vez mais utilizado no desenvolvimento de metodologias eletroanalíticas para a determinação de compostos orgânicos e inorgânicos, em diversas matrizes (PLESKOV, 2000; BAIRU, 2003) devido a suas propriedades únicas e o crescente número de trabalhos citados na literatura é um indicativo de que o eletrodo de BDD pode ser convenientemente empregado no estudo eletroquímico de diferentes classes químicas de compostos orgânicos (LUONG, 2009), inclusive torna-se uma alternativa viável e inédita para o estudo do flavonoide canferitrina. Outro material de carbono que vem sendo estudado são os eletrodos de grafite de lapiseira (PGE – do inglês pencil graphite electrodes). A análise e determinação de compostos bioativos em plantas medicinais e fitoterápicos são de grande importância para a qualidade, eficácia e segurança desses produtos.

Dentre os compostos estudados, destaca-se a apigenina, um flavonoide amplamente encontrado em diversas plantas medicinais. A apigenina tem despertado interesse devido às suas propriedades farmacológicas, como atividade anti-inflamatória, antioxidante e anticancerígena (KUMMER, 2016). Neste contexto, técnicas eletroanalíticas têm sido empregadas para a determinação da apigenina em diferentes matrizes vegetais. A voltametria é uma técnica eletroanalítica amplamente utilizada para a determinação de compostos bioativos em extratos vegetais. Contudo, é importante ressaltar que a escolha da técnica adequada depende das características do composto, da matriz vegetal e dos objetivos da análise (LUONG, 2009). Em suma, a apigenina é um flavonoide com propriedades farmacológicas importantes, sendo amplamente encontrado em plantas medicinais e fitoterápicos. A determinação eletroanalítica desse composto em matrizes vegetais é fundamental para a garantia da qualidade e segurança desses produtos.

Diferentes técnicas eletroanalíticas, como voltametria, eletroforese capilar e espectroscopia eletroquímica, têm sido empregadas com sucesso na análise da apigenina. A voltametria de onda quadrada permite a quantificação direta e rápida do composto, enquanto a eletroforese capilar possibilita a separação e quantificação dos compostos presentes nos extratos vegetais. Além disso, ela é conhecida por ter propriedades anti-inflamatórias, ajudando a reduzir a inflamação em todo o corpo. A quercetina é um flavonóide, pertencente à classe dos polifenóis, que possui uma estrutura química característica de compostos fenólicos. Sua fórmula molecular é C15H10O7 e seu nome químico é 3,3',4',5,7-pentahidroxiflavona. A estrutura da quercetina é formada por dois anéis aromáticos (anéis A e B) conectados por uma cadeia de três carbonos (anel C) que possui um grupo cetona (C=O) em uma extremidade e um grupo hidroxila (-OH) na outra.

Além disso, o anel B possui uma hidroxila adicional em sua estrutura. Disponibilidade de equipamentos e expertise: A voltametria é uma técnica eletroquímica que requer equipamentos especializados e conhecimento técnico para sua realização correta. A disponibilidade de equipamentos adequados e expertise na técnica pode ser limitada em certas regiões ou instituições, o que pode influenciar a quantidade de estudos disponíveis sobre a determinação da quercetina na Passiflora por voltametria. Gráfico 3: Artigos publicados sobre a determinação de Quercetina por meio da voltametria e eletroanalitica Fonte: A autora (2023). Gráfico 4: Artigos publicados envolvendo a determinação da quercetina na Passiflora por diferentes técnicas Fonte: A autora (2023). Zettersten et al. al. A rutina, também conhecida como quercetina-3-rutinosídeo, é um bioflavonoide composto por um açúcar chamado rutinose e uma molécula de quercetina.

Sua fórmula química é C27H30O16 e seu peso molecular é de 610,52 g/mol. Figura 4 Estrutura química da Rutina Autoral Fonte: ChemDraw (2021). Gráfico 5: Artigos publicados sobre a determinação de rutina por meio da voltametria e eletroanalitica Fonte: A autora (2023). A varredura de potencial é realizada no eletrodo de trabalho, permitindo a determinação quantitativa da rutina (KUMMER, 2016). Além das técnicas eletroanalíticas, métodos espectrofotométricos também têm sido empregados para a determinação da rutina em plantas medicinais e fitoterápicos. A espectrofotometria UV-vis é uma técnica que se baseia na absorção de luz por parte do composto de interesse, permitindo sua quantificação por meio da lei de Beer-Lambert (LUONG, 2009). Essa técnica é amplamente utilizada devido à sua simplicidade, rapidez e baixo custo.

Em conclusão, a rutina é um flavonoide com propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias, amplamente encontrado em plantas medicinais e fitoterápicos. Os valepotriatos são compostos químicos encontrados na raiz da valeriana (Valeriana officinalis). Eles são formados a partir da união de dois aminoácidos, o triptofano e o valina, com um ácido graxo. A valeriana é a única planta conhecida a produzir valepotriatos (AMIN et al. Os principais valepotriatos encontrados na valeriana são: Valtrato: é o valepotriato mais abundante na valeriana e possui propriedades ansiolíticas e sedativas. O vatrato é um composto químico encontrado na raiz da valeriana (Valeriana officinalis). metoxiapigenina: é um flavonoide que é encontrado em muitas plantas, incluindo a valeriana, e tem propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias (KHOM et al. A valeriana (Valeriana officinalis) é uma planta medicinal amplamente utilizada devido às suas propriedades sedativas e calmantes.

Seu uso terapêutico remonta à antiguidade, e atualmente é uma das plantas mais estudadas e prescritas para o tratamento de distúrbios do sono e ansiedade. Neste contexto, a determinação eletroanalítica da valeriana têm despertado interesse científico, visando a quantificação precisa de seus constituintes ativos. A valeriana é conhecida por suas raízes aromáticas, que contêm compostos bioativos responsáveis por suas propriedades terapêuticas. Os resultados indicaram que a espectroscopia de impedância eletroquímica é uma técnica sensível e seletiva para a determinação do ácido hidroxibenzóico, permitindo a análise direta de extratos de valeriana sem a necessidade de pré-tratamento complexo. A determinação eletroanalítica tem se mostrado uma abordagem analítica eficaz para a quantificação de compostos ativos em plantas medicinais, incluindo a valeriana.

A voltametria cíclica, a eletroforese capilar e a espectroscopia de impedância eletroquímica têm sido utilizadas com sucesso na determinação de componentes específicos da valeriana, como valerato de valtrato, ácido valerênico e ácido hidroxibenzóico. Em suma, a determinação eletroanalítica desempenha um papel fundamental na avaliação da qualidade e na padronização de plantas medicinais e fitoterápicos contendo valeriana. Essas técnicas fornecem informações importantes sobre a presença e a concentração de compostos bioativos na valeriana, permitindo a determinação precisa da quantidade desses compostos em diferentes preparações farmacêuticas. Outro estudo relevante foi conduzido por En-Nakra, Uzun e Hasdemir (2021), no qual foram exploradas diferentes técnicas eletroanalíticas para a determinação dos compostos voláteis da valeriana, como o ácido isovalérico.

Os pesquisadores utilizaram métodos voltamétricos e amperométricos, demonstrando a viabilidade dessas técnicas para a análise quantitativa desses compostos em extratos de valeriana. Além disso, Surucu e Abaci (2020) desenvolveram um método eletroanalítico para a determinação de ácido valerênico, um dos constituintes principais da valeriana. Nesse estudo, foram empregadas técnicas eletroquímicas, como a voltametria de pulso diferencial, obtendo-se resultados promissores para a análise quantitativa desse composto em amostras de valeriana. É importante ressaltar que a determinação eletroanalítica da valeriana oferece diversas vantagens, como a simplicidade, a rapidez e a baixa quantidade de amostra necessária. NOBREGA, 2020) 3. Cumarina A cumarina é um composto orgânico com fórmula química C9H6O2 (1,2-benzopirona) encontrada principalmente nas folhas de guaco caracterizada por possuir um aroma agradável de baunilha.

Ela pertence à classe dos cumarínicos, que são lactonas benzopirânicas derivadas do ácido cumárico. CZELUSNIAK et. al. A determinação eletroanalítica tem sido aplicada no estudo do guaco para analisar a presença de compostos ativos, como cumarinas, flavonoides e terpenos. Dentre as técnicas eletroanalíticas mais utilizadas, destacam-se a voltametria, a potenciometria e a espectroscopia eletroquímica. A voltametria tem sido amplamente empregada na determinação eletroanalítica de compostos presentes no guaco. Nessa técnica, a corrente elétrica é medida em função do potencial aplicado, permitindo a identificação e quantificação dos compostos presentes na amostra. Estudos realizados por Pinar, Yardim e Şentürk (2020) utilizando a técnica de voltametria cíclica mostraram a presença de compostos fenólicos no extrato de guaco, como o ácido cafeico e a rutina, os quais possuem propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias.

Uma delas é a alta sensibilidade das técnicas eletroquímicas, que permitem a detecção de baixas concentrações de compostos bioativos. Além disso, essas técnicas são rápidas, versáteis e de baixo custo, tornando-as acessíveis para a análise rotineira de amostras. É importante ressaltar que a qualidade e a eficácia dos fitoterápicos estão diretamente relacionadas à concentração e à presença dos compostos ativos. Portanto, a determinação eletroanalítica desempenha um papel fundamental na garantia da qualidade desses produtos, auxiliando na padronização e no controle de sua produção. No entanto, é necessário considerar algumas limitações das técnicas eletroanalíticas. Wang e Liu (2009) determinaram a cumarina em óleos essenciais e fitoterápicos chineses tradicionais utilizando solução tampão Britton-Robinson (pH = 5,83) sob um eletrodo de carbono vítreo (GCE) e mercúrio (II)- nitrato-[Hg(NO3)2] e chumbo-acetato-[Pb(CH3COO)2] modificado-GCEs utilizando técnica de voltametria de pulso cíclico e diferencial.

Para analisar reprodutibilidade e a precisão dos resultados, os autores obtiveram recuperação entre 97 e 99%. Além disso, os resultados das concentrações das amostras foram comparados com os obtidos por HPLC e obtiveram concondância entre os valores. Miyano (2014) determinou a cumarina em amostras de Mikania glomerata em eletrodo de DDB por voltametria de onda quadrada obtendo limites de detecção e quantificação de 1,5x10-6 mol L-1 e 4,5x10-6 mol L-1 e os valores de recuperação variaram entre 92 e 104%. Denise 2020, determinou a cumarina em infusões de guaco utilizando solução tampão Britton-Robinson (0,1 mol L-1, pH 10) sob um eletrodo de diamante dopado com boro a partir da técnica de voltametria de onda quadrada (VOQ). Essas análises permitem avaliar a qualidade dos extratos e preparações à base de valeriana, garantindo sua eficácia e segurança para o tratamento de distúrbios do sono e ansiedade.

A passiflora, também conhecida como maracujá, é amplamente utilizada como um agente calmante natural. As técnicas eletroanalíticas têm sido empregadas na determinação de compostos fenólicos, como a apigenina e o ácido cafeico, presentes na passiflora. Além disso, esses métodos permitem avaliar a atividade antioxidante dessa planta, fornecendo informações importantes sobre seu potencial terapêutico na prevenção de doenças relacionadas ao estresse oxidativo. O guaco, por sua vez, é uma planta com propriedades expectorantes e broncodilatadoras, amplamente utilizada no tratamento de doenças respiratórias. No entanto, é fundamental ressaltar que a determinação eletroanalítica em plantas medicinais e fitoterápicos requer um cuidadoso planejamento experimental, considerando fatores como a seleção adequada dos métodos, validação dos resultados e controle de qualidade dos materiais utilizados.

Além disso, é importante considerar as limitações e desafios inerentes a cada técnica, como a interferência de compostos coexistentes e a complexidade da matriz vegetal. Nesse contexto, são necessários investimentos contínuos em pesquisa e desenvolvimento de métodos eletroanalíticos específicos para cada planta medicinal, a fim de aprimorar a precisão, sensibilidade e confiabilidade das análises. Além disso, é fundamental promover a capacitação e atualização dos profissionais envolvidos nesse campo, a fim de garantir a correta interpretação dos resultados e a adoção das boas práticas laboratoriais. Em suma, a determinação eletroanalítica desempenha um papel fundamental na avaliação de plantas medicinais e fitoterápicos, proporcionando informações cruciais sobre sua composição química, qualidade e eficácia terapêutica.

Agência Nacional Sanitária, (2019). Farmacopeia Brasileira. Brasília. BORGES FILHO, C. Avaliação da Bioatividade do Flavonóide crisina em camundongos submetidos ao estresse crônico moderado e imprevisível. KENNEDY, W. L. Anxiolytic Effects of a Combination of Melissa officinalis and Valeriana officinalis during Laboratory induced Stress. Phytotherapy Research, 96–102. EN-NAKRA, F. et al. Utilização de técnicas eletroanalíticas na determinação de pesticidas em alimentos. Química Nova, v. p. Jan/Fev. BEJAN, D. BUNCE, N. J. Kinetic models for the oxidation of organic substrates at boron-doped diamond anodes, Chemical Engineering Journal, Volume 300, Pages 404-413. ISSN 1385-8947. KUMMER, S. RUTH, W. KRAG, U. Oxidation of flavonols in an electrochemical flow cell coupled online with ESI-MS. Electroanalysis. Analyst. v. n. p. MIYANO, D. Journal of the Brazilian Chemical Society.

V. p. MIYANO, Daniela Miwa et al. Electrochemical Study of Simple Coumarin and its Determination in Aqueous Infusion of Mikania glomerata. SURUCU, O. ABACI, S. Electrochemical determination of β-lactoglobulin in whey proteins. Food Measure, 14, 11–19 (2020). VAZ, C. C. AVACA, L. A. Electroanalysis, 1997, 9, 956. VIEIRA, Roberto Fontes, T. Y. Comportamento Eletroquímico de Apigenina em um Eletrodo de Carbono Glassy e sua Aplicação Analítica. Journal Of The Chinese Chemical Society, 303-309. YONG-HYUN KO, S. K.